背景技術(shù)：
1、遷移體是最近發(fā)現(xiàn)的遷移細(xì)胞的細(xì)胞器。在遷移過(guò)程中，細(xì)胞的后緣會(huì)拉出收縮纖維，遷移體在這些收縮纖維的分支點(diǎn)或末端生長(zhǎng)。最終，當(dāng)細(xì)胞遷移離開(kāi)時(shí)，收縮纖維斷裂，遷移體被留下。遷移體在各種生物過(guò)程中起重要作用；例如，在斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育過(guò)程中，富含趨化因子cxcl12的遷移體集中在胚胎盾腔中，cxcl12作為趨化因子引導(dǎo)背前導(dǎo)細(xì)胞遷移。因此，遷移體在器官形態(tài)發(fā)生中起重要作用。此外，已顯示遷移體在細(xì)胞間介導(dǎo)mrna的橫向轉(zhuǎn)移。
2、遷移體已在各種生物環(huán)境中觀察到，并已顯示在體內(nèi)起重要的生理作用。然而，遷移體在調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能中的作用和調(diào)節(jié)尚不清楚。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
0、發(fā)明概述
1、本公開(kāi)提供了一種調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括調(diào)節(jié)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體的形成和/或功能。
2、本公開(kāi)提供了一種調(diào)節(jié)凝血的方法，所述方法包括提供一種遷移體，所述遷移體衍生自中性粒細(xì)胞。
3、本公開(kāi)提供了一種遷移體，所述遷移體衍生自中性粒細(xì)胞。
4、本公開(kāi)提供了一種用于調(diào)節(jié)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體的形成和/或功能的試劑。
5、本公開(kāi)提供了一種工程化細(xì)胞，與相應(yīng)的未修飾細(xì)胞相比，所述細(xì)胞具有改變的調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能的能力，所述工程化細(xì)胞已被修飾以改變其遷移體生成能力。
6、本公開(kāi)提供了一種組合物，包括本申請(qǐng)上述的遷移體、試劑和/或工程化細(xì)胞。
7、本公開(kāi)提供了一種試劑盒，包括本申請(qǐng)上述的遷移體、試劑、工程化細(xì)胞和/或組合物。
8、本公開(kāi)提供了一種監(jiān)測(cè)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括分析從生物樣本中獲得的遷移體的存在、數(shù)量和/或功能。
9、本公開(kāi)提供了一種調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括：(i)根據(jù)本申請(qǐng)上述方法監(jiān)測(cè)凝血；和(ii)根據(jù)步驟(i)的結(jié)果施用調(diào)節(jié)劑。
10、本公開(kāi)提供了一種監(jiān)測(cè)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體的方法，所述方法包括分析所述遷移體的標(biāo)志物分子的存在和/或數(shù)量。
11、本公開(kāi)提供了一種分離血小板的方法，所述方法包括從樣本中排除衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體。
12、本公開(kāi)提供了一種包含根據(jù)本申請(qǐng)上述分離方法分離的血小板的組合物。
13、本公開(kāi)提供了一種試劑盒，包括根據(jù)本申請(qǐng)上述分離的血小板和/或組合物。
14、從以下詳細(xì)描述中，本公開(kāi)其他方面和優(yōu)點(diǎn)對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)，其中僅展示和描述了本公開(kāi)的示例性實(shí)施方式。應(yīng)當(dāng)意識(shí)到，本公開(kāi)能夠有其他和不同的實(shí)施方式，其若干細(xì)節(jié)能夠在各種明顯方面進(jìn)行修改，所有這些都不偏離本公開(kāi)的范圍。因此，附圖和描述應(yīng)被視為說(shuō)明性的，而不是限制性的。
15、通過(guò)引用并入
16、本說(shuō)明書(shū)中提到的所有出版物、專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)通過(guò)引用的方式被并入到本申請(qǐng)，與每個(gè)單獨(dú)出版物、專(zhuān)利或?qū)＠暾?qǐng)被特別和單獨(dú)指明通過(guò)引用并入的效力相同。
1.一種調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括調(diào)節(jié)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體的形成和/或功能。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述血小板功能包括血小板聚集和/或凝血酶生成。
3.如權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述調(diào)節(jié)凝血包括調(diào)節(jié)出血。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體是ly6g+。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法增加凝血和/或血小板的功能，和包括促進(jìn)所述遷移體的形成和/或功能。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加在所述中性粒細(xì)胞和/或遷移體中的四跨膜蛋白、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
7.如權(quán)利要求5-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括在所述中性粒細(xì)胞中過(guò)表達(dá)四跨膜蛋白、其功能片段和/或其功能變體。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述四跨膜蛋白包括tspan1、tspan2、tspan4、tspan6、tspan7、tspan9、tspan18、cd82、cd81、tspan13、cd53、tspan3、tspan5和/或cd37。
9.如權(quán)利要求5-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加鞘磷脂的數(shù)量和/或功能。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中，所述促進(jìn)移體的形成和/或功能包括增加細(xì)胞中神經(jīng)酰胺向鞘磷脂的轉(zhuǎn)化。
11.如權(quán)利要求9-10中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加細(xì)胞中鞘磷脂合酶的表達(dá)和/或功能。
12.如權(quán)利要求9-11中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)，遷移體的形成和/或功能包括在所述中性粒細(xì)胞中過(guò)表達(dá)鞘磷脂合酶2(sgms2)、其功能片段和/或其功能變體。
13.如權(quán)利要求9-12中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括減少在所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂向神經(jīng)酰胺的降解。
14.如權(quán)利要求9-13中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括減少在所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂酶(sphingomyelinase，smase)的表達(dá)和/或功能。
15.如權(quán)利要求5-14中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加pip2、pip5k1和/或rab35的數(shù)量和/或功能。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述pip2包括pi(4,5)p2。
17.如權(quán)利要求15-16中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加pi4p向pip2的轉(zhuǎn)化。
18.如權(quán)利要求15-17中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加pi4p激酶的數(shù)量和/或功能。
19.如權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加pip5k1、其功能片段和/或其功能變體的表達(dá)和/或功能。
20.如權(quán)利要求15-19中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述pip5k1包括pip5k1α和/或pip5k1γ。
21.如權(quán)利要求15-20中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括減少在所述中性粒細(xì)胞中pip2向pi4p的降解。
22.如權(quán)利要求15-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括減少在所述中性粒細(xì)胞中plcd3的表達(dá)和/或功能。
23.如權(quán)利要求15-22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加rab35的表達(dá)和/或功能。
24.如權(quán)利要求5-23中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加在生成所述中性粒細(xì)胞的細(xì)胞中的膽固醇的數(shù)量和/或功能。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加所述中性粒細(xì)胞的膽固醇合成和/或攝取。
26.如權(quán)利要求24-25中任一項(xiàng)所述的方法，其中，促進(jìn)膽固醇攝取包括在膽固醇富集環(huán)境中培養(yǎng)所述中性粒細(xì)胞。
27.如權(quán)利要求5-26中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的形成和/或功能包括增加整合素蛋白和/或細(xì)胞外基質(zhì)(ecm)蛋白的數(shù)量和/或功能。
28.如權(quán)利要求27所述的方法，其中，所述整合素蛋白包括整合素α1、整合素α2、整合素α3、整合素α5和/或整合素α6。
29.如權(quán)利要求27-28中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述ecm蛋白包括纖連蛋白、層粘連蛋白和/或膠原蛋白。
30.如權(quán)利要求5-29中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述促進(jìn)遷移體的功能包括增加遷移體上的凝血因子、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
31.如權(quán)利要求30所述的方法，其中，所述凝血因子包括凝血酶原、因子xiii、因子x、因子viii、因子xi、因子xii和/或vwf。
32.如權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述的方法減少凝血和/或血小板的功能，并包括抑制所述遷移體的形成和/或功能。
33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括抑制在所述中性粒細(xì)胞和/或遷移體中的四跨膜蛋白的表達(dá)和/或功能。
34.如權(quán)利要求33所述的方法，其中，所述抑制四跨膜蛋白的表達(dá)和/或功能包括敲除或敲低在所述中性粒細(xì)胞中編碼所述四跨膜蛋白的基因的表達(dá)。
35.如權(quán)利要求33-34中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述四跨膜蛋白包括四跨膜蛋白4和/或四跨膜蛋白9。
36.如權(quán)利要求32-35中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少鞘磷脂的數(shù)量和/或功能。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少在所述細(xì)胞中神經(jīng)酰胺向所述鞘磷脂的轉(zhuǎn)化。
38.如權(quán)利要求36-37中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少在所述細(xì)胞中鞘磷脂合酶的表達(dá)和/或功能。
39.如權(quán)利要求36-38中任一項(xiàng)所述的方法，其中。所述抑制遷移體的形成和/或功能包括敲除或敲低在所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂合酶2(sgms2)、其功能片段和/或其功能變體。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中。所述抑制遷移體的形成和/或功能包括提供能夠抑制所述sgms2功能的試劑。
41.如權(quán)利要求40所述的方法，其中，所述sgms2抑制劑抑制sgms2焦點(diǎn)(foci)的組裝和/或sgms2的催化活性。
42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述sgms2抑制劑包括sgms2-in-1、sgms2-in-2、ly93、顯性負(fù)性sgms2和/或其衍生物。
43.如權(quán)利要求36-42中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括增加在所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂向神經(jīng)酰胺的降解。
44.如權(quán)利要求36-43中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括增加在所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂酶(smase)的表達(dá)和/或功能。
45.如權(quán)利要求32-44中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少pip2、pip5k1和/或rab35的數(shù)量和/或功能。
46.如權(quán)利要求45所述的方法，其中，所述pip2包括pi(4,5)p2。
47.如權(quán)利要求45-46中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少pi4p向pip2的轉(zhuǎn)化。
48.如權(quán)利要求45-47中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少pi4p激酶的數(shù)量和/或功能。
49.如權(quán)利要求45-48中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少pip5k1、其功能片段和/或其功能變體的表達(dá)和/或功能。
50.如權(quán)利要求49所述的方法，其中，所述pip5k1包括pip5k1α和/或pip5k1γ。
51.如權(quán)利要求45-50中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括增加在所述中性粒細(xì)胞中pip2向pi4p的降解。
52.如權(quán)利要求45-51中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括增加在所述中性粒細(xì)胞中plcd3的表達(dá)和/或功能。
53.如權(quán)利要求45-52中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少rab35的表達(dá)和/或功能。
54.如權(quán)利要求45-53中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括提供未與rab35結(jié)合的itga5。
55.如權(quán)利要求32-54中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少在生成所述中性粒細(xì)胞的細(xì)胞中的膽固醇的數(shù)量和/或功能。
56.如權(quán)利要求55所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括抑制所述中性粒細(xì)胞的膽固醇合成和/或攝取。
57.如權(quán)利要求55-56中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制中性粒細(xì)胞的膽固醇合成和/或攝取包括向所述中性粒細(xì)胞施用膽固醇合成抑制劑。
58.如權(quán)利要求57所述的方法，其中，所述膽固醇合成抑制劑包括普伐他汀。
59.如權(quán)利要求55-58中任一項(xiàng)所述的方法，其中，抑制膽固醇的攝取包括在去除膽固醇環(huán)境中培養(yǎng)所述中性粒細(xì)胞。
60.如權(quán)利要求32-59中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體的形成和/或功能包括減少整合素蛋白和/或細(xì)胞外基質(zhì)(ecm)蛋白的數(shù)量和/或功能。
61.如權(quán)利要求60所述的方法，其中，所述整合素蛋白包括整合素α1、整合素α2、整合素α3、整合素α5和/或整合素α6。
62.如權(quán)利要求60-61中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述ecm蛋白包括纖連蛋白、層粘連蛋白和/或膠原蛋白。
63.如權(quán)利要求32-62中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述抑制遷移體功能包括減少遷移體上的凝血因子、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
64.如權(quán)利要求63所述的方法，其中，所述減少凝血因子的數(shù)量和/或功能包括用能夠抑制所述凝血因子功能的試劑處理所述遷移體。
65.如權(quán)利要求63-64中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述能夠抑制所述凝血因子功能的試劑包括能夠抑制所述凝血因子活性的蛋白酶、小分子和/或抗體。
66.如權(quán)利要求63-65中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述凝血因子包括凝血酶原、因子xiii、因子x、因子viii、因子xi、因子xii和/或vwf。
67.一種調(diào)節(jié)凝血的方法，所述方法包括提供一種遷移體，所述遷移體衍生自中性粒細(xì)胞。
68.如權(quán)利要求67所述的方法，其中，所述遷移體包括凝血因子、其功能片段和/或其功能變體。
69.如權(quán)利要求68所述的方法，其中，所述凝血因子包括凝血酶原、因子xiii、因子x、因子viii、因子xi、因子xii和/或vwf。
70.如權(quán)利要求67-69中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述調(diào)節(jié)凝血包括調(diào)節(jié)出血。
71.如權(quán)利要求67-70中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體是ly6g+。
72.一種遷移體，所述遷移體衍生自中性粒細(xì)胞。
73.如權(quán)利要求72所述的遷移體，其中，所述遷移體是ly6g+。
74.如權(quán)利要求72-73中任一項(xiàng)所述的遷移體，其中，所述遷移體為mpo陽(yáng)性。
75.如權(quán)利要求72-74中任一項(xiàng)所述的遷移體，其中，所述遷移體用于調(diào)節(jié)凝血。
76.一種用于調(diào)節(jié)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體形成和/或功能的試劑。
77.如權(quán)利要求76所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)在所述中性粒細(xì)胞和/或所述遷移體中的四跨膜蛋白、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
78.如權(quán)利要求77所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)鞘磷脂的數(shù)量和/或功能。
79.如權(quán)利要求76-78中任一項(xiàng)所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)pip2、pip5k1和/或rab35的數(shù)量和/或功能。
80.如權(quán)利要求76-79中任一項(xiàng)所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)在生成所述中性粒細(xì)胞的細(xì)胞中的膽固醇的數(shù)量和/或功能。
81.如權(quán)利要求76-80中任一項(xiàng)所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)整合素蛋白和/或細(xì)胞外基質(zhì)(ecm)蛋白的數(shù)量和/或功能。
82.如權(quán)利要求76-81中任一項(xiàng)所述的用于調(diào)節(jié)的試劑，其中，所述試劑調(diào)節(jié)在所述遷移體上的凝血因子、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
83.一種工程化細(xì)胞，相對(duì)于相應(yīng)的未修飾細(xì)胞，所述工程化細(xì)胞具有改變的凝血和/或血小板功能的能力，所述工程化細(xì)胞已被修飾以改變其遷移體生成能力。
84.如權(quán)利要求83所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加生成遷移體的能力。
85.如權(quán)利要求84所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加其中的四跨膜蛋白的數(shù)量和/或功能。
86.如權(quán)利要求85所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以過(guò)表達(dá)四跨膜蛋白、其功能片段、其功能變體和/或編碼其一或多個(gè)的核酸分子。
87.如權(quán)利要求85-86中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述四跨膜蛋白包括tspan1、tspan2、tspan4、tspan6、tspan7、tspan9、tspan18、cd82、cd81、tspan13、cd53、tspan3、tspan5和/或cd37。
88.如權(quán)利要求84-87中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加鞘磷脂的數(shù)量和/或功能。
89.如權(quán)利要求88所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加細(xì)胞中神經(jīng)酰胺向所述鞘磷脂的轉(zhuǎn)化。
90.如權(quán)利要求88-89中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加細(xì)胞中鞘磷脂合酶的表達(dá)和/或功能。
91.如權(quán)利要求88-90中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以在所述中性粒細(xì)胞中過(guò)表達(dá)鞘磷脂合酶2(sgms2)、其功能片段和/或其功能變體。
92.如權(quán)利要求88-91中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂向神經(jīng)酰胺的降解。
93.如權(quán)利要求88-92中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂酶(smase)的表達(dá)和/或功能。
94.如權(quán)利要求84-93中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加pip2、pip5k1和/或rab35的數(shù)量和/或功能。
95.如權(quán)利要求94所述的工程化細(xì)胞，其中，所述pip2包括pi(4,5)p2。
96.如權(quán)利要求94-95中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加pi4p向pip2的轉(zhuǎn)化。
97.如權(quán)利要求94-96中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加pi4p激酶的數(shù)量和/或功能。
98.如權(quán)利要求94-97中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加pip5k1、其功能片段和/或其功能變體的表達(dá)和/或功能。
99.如權(quán)利要求94-98中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述pip5k1包括pip5k1α和/或pip5k1γ。
100.如權(quán)利要求94-99中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞中pip2向pi4p的降解。
101.如權(quán)利要求94-100中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少所述中性粒細(xì)胞中plcd3的表達(dá)和/或功能。
102.如權(quán)利要求94-101中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加rab35的表達(dá)和/或功能。
103.如權(quán)利要求84-102中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加在生成所述中性粒細(xì)胞的細(xì)胞中的膽固醇的數(shù)量和/或功能。
104.如權(quán)利要求103所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞的膽固醇合成和/或攝取。
105.如權(quán)利要求103-104中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，促進(jìn)膽固醇攝取包括在膽固醇富集環(huán)境中培養(yǎng)所述中性粒細(xì)胞。
106.如權(quán)利要求84-105中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加整合素蛋白和/或細(xì)胞外基質(zhì)(ecm)蛋白的數(shù)量和/或功能。
107.如權(quán)利要求106所述的工程化細(xì)胞，其中，所述整合素蛋白包括整合素α1、整合素α2、整合素α3、整合素α5和/或整合素α6。
108.如權(quán)利要求106-107中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述ecm蛋白包括纖連蛋白、層粘連蛋白和/或膠原蛋白。
109.如權(quán)利要求84-108中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加在所述遷移體上的凝血因子、其功能片段和/或其功能變體的數(shù)量和/或功能。
110.如權(quán)利要求109所述的工程化細(xì)胞，其中，所述凝血因子包括凝血酶原、因子xiii、因子x、因子viii、因子xi、因子xii和/或vwf。
111.如權(quán)利要求83所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少生成遷移體的能力。
112.如權(quán)利要求111所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少其中的四跨膜蛋白的數(shù)量和/或功能。
113.如權(quán)利要求112所述的工程化細(xì)胞，其中，編碼四跨膜蛋白的基因的表達(dá)已被敲除或敲低。
114.如權(quán)利要求112-113中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述四跨膜蛋白包括四跨膜蛋白4和/或四跨膜蛋白9。
115.如權(quán)利要求111-114中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少鞘磷脂的數(shù)量和/或功能。
116.如權(quán)利要求115所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少細(xì)胞中神經(jīng)酰胺向所述鞘磷脂的轉(zhuǎn)化。
117.如權(quán)利要求115-116中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少細(xì)胞中鞘磷脂合酶的表達(dá)和/或功能。
118.如權(quán)利要求115-117中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以在所述中性粒細(xì)胞中敲除或敲低鞘磷脂合酶2(sgms2)、其功能片段和/或其功能變體。
119.如權(quán)利要求118所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以提供能夠抑制所述sgms2功能的試劑。
120.如權(quán)利要求119所述的工程化細(xì)胞，其中。所述sgms2抑制劑抑制sgms2焦點(diǎn)的組裝和/或sgms2的催化活性。
121.如權(quán)利要求119-120中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述sgms2抑制劑包括sgms2-in-1、sgms2-in-2、ly93、顯性負(fù)性sgms2和/或其衍生物。
122.如權(quán)利要求115-121中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂向神經(jīng)酰胺的降解。
123.如權(quán)利要求115-122中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞中鞘磷脂酶(smase)的表達(dá)和/或功能。
124.如權(quán)利要求111-123中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少pip2、pip5k1和/或rab35的數(shù)量和/或功能。
125.如權(quán)利要求124所述的工程化細(xì)胞，其中，所述pip2包括pi(4,5)p2。
126.如權(quán)利要求124-125中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少pi4p激酶的數(shù)量和/或功能。
127.如權(quán)利要求124-126中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少pip5k1、其功能片段和/或其功能變體的表達(dá)和/或功能。
128.如權(quán)利要求124-127中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述pip5k1包括pip5k1α和/或pip5k1γ。
129.如權(quán)利要求124-128中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞中pip2向pi4p的降解。
130.如權(quán)利要求124-129中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以增加所述中性粒細(xì)胞中plcd3的表達(dá)和/或功能。
131.如權(quán)利要求124-130中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少rab35的表達(dá)和/或功能。
132.如權(quán)利要求124-131中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以表達(dá)未與rab35結(jié)合的itga5。
133.如權(quán)利要求111-132中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以減少在生成所述中性粒細(xì)胞的細(xì)胞中的膽固醇的數(shù)量和/或功能。
134.如權(quán)利要求133所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以抑制所述中性粒細(xì)胞的膽固醇合成和/或攝取。
135.如權(quán)利要求133-134中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，所述工程化細(xì)胞已被修飾以施用膽固醇合成抑制劑。
136.如權(quán)利要求135所述的工程化細(xì)胞，其中，所述膽固醇合成抑制劑包括普伐他汀。
137.如權(quán)利要求133-136中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞，其中，抑制膽固醇的攝取包括在去除膽固醇環(huán)境中培養(yǎng)所述中性粒細(xì)胞。
138.一種組合物，包括權(quán)利要求72-75中任一項(xiàng)所述的遷移體、權(quán)利要求76-82中任一項(xiàng)所述的試劑和/或權(quán)利要求83-137中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞。
139.如權(quán)利要求138所述的組合物，其為藥物組合物，并可選擇性地包括藥學(xué)上可接受的賦形劑。
140.一種試劑盒，包括權(quán)利要求72-75中任一項(xiàng)所述的遷移體、權(quán)利要求76-82中任一項(xiàng)所述的試劑、權(quán)利要求83-137中任一項(xiàng)所述的工程化細(xì)胞和/或權(quán)利要求138-139中任一項(xiàng)所述的組合物。
141.一種用于監(jiān)測(cè)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括分析從生物樣本中獲得的遷移體的存在、數(shù)量和/或功能。
142.如權(quán)利要求141所述的方法，其中，所述的血小板功能包括血小板聚集和/或凝血酶生成。
143.如權(quán)利要求141-142中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述生物樣本包括受試者的體液樣本。
144.如權(quán)利要求141-143中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述生物樣本包括受試者的血液樣本。
145.如權(quán)利要求141-144中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體的數(shù)量增加指示所述凝血和/或血小板功能的增加。
146.如權(quán)利要求141-145中任一項(xiàng)所述的方法，其中，分析所述遷移體的存在、數(shù)量和/或功能包括分析所述遷移體的標(biāo)志分子的存在和/或數(shù)量。
147.如權(quán)利要求141-146中任一項(xiàng)所述的方法，其中分析所述遷移體的存在、數(shù)量和/或功能包括確定所述生物樣本中tspan4+、integrin+、pleckstrin同源(pleckstrinhomology，ph)結(jié)構(gòu)域+、ndst1+、pigk+、cpq+、eogt+、kul01+、cd115+和/或ccr2+囊泡的存在和/或數(shù)量。
148.如權(quán)利要求141-147中任一項(xiàng)所述的方法，其中，分析所述遷移體的存在、數(shù)量和/或功能包括用小麥胚芽凝集素(wheat?germ?agglutinin，wga)染色所述生物樣本。
149.如權(quán)利要求141-148中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體是ly6g+。
150.如權(quán)利要求141-149中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體為mpo陽(yáng)性。
151.一種調(diào)節(jié)凝血和/或血小板功能的方法，所述方法包括：(i)根據(jù)權(quán)利要求141-150中任一項(xiàng)監(jiān)測(cè)凝血；以及(ii)根據(jù)步驟(i)的結(jié)果施用調(diào)節(jié)劑。
152.一種監(jiān)測(cè)衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體的方法，所述方法包括分析所述遷移體的標(biāo)志分子的存在和/或數(shù)量。
153.如權(quán)利要求152所述的方法，其中，所述遷移體為mpo陽(yáng)性。
154.如權(quán)利要求152-153中任一項(xiàng)所述的方法，其中，分析所述遷移體的存在、數(shù)量和/或功能包括確定所述生物樣本中tspan4+、integrin+、pleckstrin同源(pleckstrinhomology，ph)結(jié)構(gòu)域+、ndst1+、pigk+、cpq+、eogt+、kul01+、cd115+和/或ccr2+囊泡的存在和/或數(shù)量。
155.如權(quán)利要求152-154中任一項(xiàng)所述的方法，其中，分析所述遷移體的存在、數(shù)量和/或功能包括用小麥胚芽凝集素(wga)染色所述生物樣本。
156.如權(quán)利要求152-155中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述遷移體是ly6g+。
157.一種分離血小板的方法，所述方法包括排除樣本中的衍生自中性粒細(xì)胞的遷移體。
158.如權(quán)利要求157所述的方法，其中，所述方法包括在采集生物樣本之前去除中性粒細(xì)胞。
159.如權(quán)利要求157-158中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法包括提供ly6g結(jié)合劑以去除中性粒細(xì)胞。
160.如權(quán)利要求157-159中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法包括提供抗ly6g抗體以去除中性粒細(xì)胞。
161.如權(quán)利要求157-160中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法包括在采集生物樣本之前五天或更長(zhǎng)時(shí)間提供抗ly6g抗體。
162.如權(quán)利要求157-161中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)離心收集所述血小板。
163.一種組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求157-162中任一項(xiàng)分離的血小板。
164.如權(quán)利要求163所述的組合物，其為藥物組合物，并可選擇性地包括藥學(xué)上可接受的賦形劑。
165.一種試劑盒，包括根據(jù)權(quán)利要求157-162中任一項(xiàng)分離的血小板和/或根據(jù)權(quán)利要求163-164中任一項(xiàng)所述的組合物。